BCRP 过表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的：探讨乳腺癌耐药蛋白（BCRP）基因过表达对人乳腺癌细胞MDA-MB-435 S增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期的 MDA-MB-435S 细胞，将其随机分为三组，阳性转染组将真核表达质粒 pcDNA3．1／BCRP 经双酶切和测序鉴定后转染 MDA-MB-435S 细胞，阴性对照组同步转染2μg pcDNA3．1的空质粒，空白对照组用2 mL 原培养液正常培养。采用 RT-PCR 法和 Western blotting 法检测 BCRP mRNA 和蛋白表达。转染后48 h，每组再分设7个丝裂霉素（MMC）浓度（0．01、0．10、2．50、5．00、10．00、20．00、40．00μmol／L）组，每个浓度组3个复孔，加入相应浓度的 MMC 10μL，采用 CCK-8法检测细胞增殖情况；流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果重组真核表达质粒 pcDNA3．1／BCRP 经双酶切和测序证实该质粒构建正确；阳性转染组转染24、48、72 h 后，MDA-MB-435S 细胞中 BCRP mRNA 和蛋白表达均明显增加（P 均＜0．05）；与阴性对照组比较，阳性转染组转染 pcDNA3．1／BCRP 48 h 后，细胞凋亡率无统计学差异（P ＞0．05）；CCK-8结果显示，化疗药物 MMC 作用24 h 后，与阴性对照组比较，阳性转染组转染 pcDNA3．1／BCRP 48h 后细胞存活率显著增加（P ＜0．05）。结论BCRP 过表达可促进人乳腺癌细胞 MDA-MB-435S 增殖，但对细胞凋亡无明显影响。

关键词：乳腺癌、乳腺癌耐药蛋白、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：56

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81573462；辽宁省高等学校优秀人才支持计划项目LJQ2015118。

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23