转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力观察

摘要：

目的 设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因的小干扰RNA(siRNA),构建其慢病毒表达载体,观察转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力.方法 根据siRNA设计原则,参照IGF1R mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染肝癌细胞株Huh724 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF1R mRNA,筛选干扰效率最高的siRNA序列.构建该序列的慢病毒表达载体,转染293T细胞进行病毒包装.将包装好的慢病毒表达载体感染肝癌细胞株Huh7和Hep3B,筛选沉默IGF1R基因表达的稳定细胞株.将上述稳定细胞株扩大培养,观察细胞IGF1R mRNA表达变化及细胞增殖、迁移与侵袭能力变化.结果 实时荧光定量PCR显示,IGF1R_002序列在100 nmol/L浓度时抑制效率最高,达78.6%.与未感染任何病毒的Huh7、Hep3B细胞,感染pLVX-shRNA2空载体的Huh7、Hep38细胞相比,感染携带IGF1R干扰序列慢病毒的Huh7、Hep3B细胞IGF1R mRNA表达水平显著下调,细胞增殖活性明显降低,细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P均＜0.01).结论 筛选出1对高效沉默IGF1R基因的siRNA序列,即IGF1R_002;该siRNA介导的IGF1R基因沉默可明显抑制肝癌细胞株Huh7和Hep3 B增殖、迁移与侵袭.

关键词：RNA干扰、人胰岛素样生长因子1受体基因、小干扰RNA、肝细胞癌

所属期刊栏目：56

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：深圳市科技计划研究项目JCYJ20140414160300592

在线出版日期：2016-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

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