miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其分子机制

摘要：

目的 探讨miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用,并验证其靶点蛋白. 方法 传代培养人结肠癌细胞株HCT-116,分别采用空病毒载体( pRI-CMV-GFP)转染(阴性对照组)、慢病毒载体( pRI-CMV-GFP-miRNA-34a)转染(慢病毒组),另选未经任何处理的HCT-116细胞作为空白对照组. 采用Real-time PCR法检测miR-34a的相对表达量,采用MTT实验、Transwell 小室法检测HCT-116 细胞增殖和迁移能力,采用细胞免疫荧光试验和Western blotting法验证其靶点蛋白. 结果 以空白对照组miR-34a表达为1,阴性对照组为1.03 ±0.09,慢病毒组为6.41 ±1.56,慢病毒组高于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01),证实慢病毒转染成功. 与空白对照组、阴性对照组比较,慢病毒组细胞增殖和迁移能力显著下降(P均<0.01). 细胞免疫荧光试验显示,慢病毒组细胞c-Met的荧光强度显著降低,而空白对照组与阴性对照组无明显变化. Western blotting 结果显示,慢病毒组c-Met及磷酸化c-Met表达均低于阴性对照组、空白对照组(P均<0.01). 结论 过表达miR-34a可抑制结肠癌细胞增殖及迁移,并下调靶点蛋白c-Met及磷酸化c-Met表达,提示miR-34a可作为结肠癌治疗的分子靶点.

关键词：结肠癌、miR-34a、细胞增殖、细胞迁移、c-Met

所属期刊栏目：56

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：上海市浦东新区卫生和计划生育委员会卫生科技项目PW2014A-28

在线出版日期：2016-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：14-16,后插1