PDX-1基因克隆载体的体外构建

摘要：

目的：体外构建胰-十二指肠同源框-1( PDX-1)基因的克隆载体。方法采用TRIzol方法从大鼠胰岛细胞瘤细胞株中提取RNA,通过RT-PCR方法在体外扩增大鼠PDX-1 cDNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定,割胶纯化后回收目的基因,与pMD-18T克隆载体连接构建,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定pMD-18T-PDX-1的正确构建。结果正确构建了含有PDX-1 cDNA的克隆载体pMD-18T-PDX-1,其中PDX-1 cDNA全长为908 bp。将经双酶切鉴定正确的pMD-18T-PDX-1细菌克隆进行测序,测定结果与GenBank中大鼠PDX-1基因序列(NM_022852.3)一致。结论成功构建了PDX-1基因克隆载体。该载体可为PDX-1基因分子生物学研究及PDX-1基因在诱导非β细胞向胰岛素分泌细胞分化中作用机制的研究提供基础。

关键词：胰-十二指肠同源框-1、cDNA、胰岛细胞瘤、克隆载体

分类号：R587(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：安徽省教育厅自然科学基金资助项目KJ2012Z192。

在线出版日期：2016-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：31-33