10.3969/j.issn.1002-266X.2015.30.005
小鼠 Sca-1阳性心脏内源性干细胞的分离、扩增及标记物观察
目的:分离、扩增干细胞抗原1( Sca-1)阳性心脏内源性干细胞,并观察其标记物情况。方法取C57 BL/6小鼠心肌组织,用磁珠分选法分离Sca-1阳性内源性心脏干细胞,并对其传代扩增。观察初分离及传代过程中细胞形态的变化,用流式细胞仪检测初分离及扩增后(第5代) Sca-1阳性心脏干细胞阳性率,以RT-PCR法检测Sca-1阳性及阴性心脏干细胞肌球蛋白重链6(MYH6)、肌钙蛋白T(cTnT)、心肌转录因子4(GATA4)标记物的表达。结果初分离的Sca-1阳性心脏干细胞为圆形,比血细胞小;传代后细胞呈现星形,伸出较长的伪足,第5代后形状差异不大。原代、第5代心肌细胞Sca-1阳性心脏干细胞阳性率分别为81.0%±10.4%、90.0%±5.0%,P>0.05;Sca-1阳性心脏干细胞MYH6、cTnT、GATA4相对表达量分别为0.50±0.21、0.72±0.04、0.72±0.05,阴性心脏干细胞分别为0.20±0.02、0.86±0.06、0.71±0.05,两者MYH6、cTnT比较,P均<0.05。结论成功分离出Sca-1阳性心脏干细胞,且传代稳定、纯度较高,高表达MYH6。
心脏干细胞、肌球蛋白重链6、肌钙蛋白T、心肌转录因子4、磁珠分选法
R541(心脏、血管(循环系)疾病)
国家自然科学基金资助项目31371158。
2015-09-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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