人Ⅱ型大麻受体真核表达体系构建及其在 HEK293细胞中的表达

摘要：

目的：构建人Ⅱ型大麻受体（ hCB2）基因GV230真核表达质粒，并检测hCB2基因在HEK293细胞中的表达。方法利用人脑皮质细胞的总RNA为模板，RT-PCR获得cDNA，通过酶切、连接及测序鉴定正确后，再将目的片段插入真核表达载体GV230，构建重组表达质粒GV230-hCB2，阳性克隆用脂质体瞬时转染HEK293细胞。激光共聚焦扫描显微镜和Western blotting法检测hCB2基因表达产物在细胞的表达情况。结果扩增出hCB2基因片段，成功构建了重组表达质粒，并检测到目的蛋白在转染细胞中表达，观察到hCB2受体在胞膜分布和表达。结论成功构建GV230-hCB2质粒，该质粒在HEK293细胞中能表达hCB2蛋白，此为进一步研究hCB2生物学功能奠定了实验基础。

关键词：Ⅱ型大麻受体、基因克隆、真核表达

分类号：R394

资助基金：重庆市基础与前沿研究计划项目 cstc2014 jcyjA10049。

在线出版日期：2015-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：14-16