三向连接构造组合引物介导的滚环扩增技术检测肠道病毒71型方法的建立

摘要：

目的：建立三向连接构造（3WJ）组合引物介导的滚环扩增（ PG-RCA）技术检测肠道病毒71型（ EV71）的方法，并验证其检测效果。方法根据EV71的VP1基因保守区设计引物模板、引物以及环状探针前体，确立反应体系及反应条件，实时荧光PCR仪监测扩增结果。采用已建立的3WJ组合PG-RCA技术检测16例手足口病患儿咽拭子标本（ EV71阳性12例、柯萨奇病毒A阳性2例、柯萨奇病毒B阳性2例）。结果已建立的3 WJ组合PG-RCA技术能检测到amol级的EV71 RNA，说明方法建立成功。 EV71阳性标本扩增曲线荧光强度均超过阈值；柯萨奇病毒A、B阳性标本扩增曲线荧光强度均低于阈值。结论成功建立3WJ组合PG-RCA技术检测EV71的方法，检测效果好。

关键词：肠道病毒71型、恒温扩增、滚环扩增、三向连接

分类号：R446.1(诊断学)

资助基金：江苏省南通市科技项目HS2013028；江苏省南通市卫生局资助项目W201224。

在线出版日期：2015-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：21-23,111