10.3969/j.issn.1002-266X.2015.28.003
检测癫痫大鼠脑组织中 Glu、Gly、GABA 含量的异硫氰酸苯酯柱前衍生 HPLC 技术的建立
目的:建立检测癫痫大鼠脑组织谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)含量的异硫氰酸苯酯( PITC)柱前衍生高效液相色谱( HPLC)技术,并验证其检测效果。方法将海人藻酸( KA)或等量生理盐水注射入大鼠海马CA3区建立癫痫模型或对照,2周后分别取其海马和皮层组织,采用PITC柱前衍生法处理样品,采用醋酸钠缓冲液和乙腈梯度洗脱,Venusil-AA氨基酸分析柱结合紫外检测器检测,计算Glu、GABA、Gly含量。结果在30 min内3种氨基酸完全出峰。在0.20~12.50 mg/L范围内Glu线性关系良好,相关系数为0.9993,日内精密度为1.46%,日间精密度为1.84%,加样回收率为97.12%±2.98%;在0.01~6.25 mg/L范围内Gly线性关系良好,相关系数为0.9984,日内精密度为1.17%,日间精密度为1.62%,加样回收率为96.63%±1.28%;在0.10~6.25 mg/L范围内GABA线性关系良好,相关系数为0.9994,日内精密度为1.00%,日间精密度为1.53%,加样回收率为99.25%±2.98%。模型组海马和皮层中Glu含量均高于对照组相应组织(P均<0.05)。结论成功建立了检测癫痫大鼠脑组织Glu、Gly、GABA含量的PITC柱前衍生HPLC技术检测效果较好。
癫痫、高效液相色谱、异硫氰酸苯酯、柱前衍生、谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸、大鼠
O657.72;R338.2(分析化学)
国家自然科学基金面上项目81071075;安徽省自然科学基金资助项目090413096;皖南医学院中青年科研基金资助项目WK201201。
2015-08-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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