10.3969/j.issn.1002-266X.2015.28.002
Sclerostin 对骨形态发生蛋白2诱导的人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
目的:探讨Sclerostin对骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法取两位男性车祸伤致截肢患者的骨髓组织进行体外人BMSCs培养。将培养细胞随机分为三组,1组未做转染( Mock),2组转染对照siRNA,3组转染Sclerostin(骨形态发生蛋白抑制剂) siRNA,均采用含有0.1μg/mL BMP-2的成骨诱导培养基培养。分别在诱导培养的第0、3、7天,采用CCK-8法检测各组细胞活性,采用CyQUANT细胞增殖检测试剂盒检测DNA含量。在培养的第14天,采用RT-PCR方法检测骨相关基因骨钙素( OCN)、骨钙蛋白( OC)及骨桥蛋白( OPN),采用碱性磷酸酶( ALP)分析试剂盒进行ALP活性分析,采用BCA蛋白检测试剂盒检测细胞蛋白含量。结果在诱导培养的第3、7天,3组细胞增殖活性、DNA含量均高于1、2组(P均<0.05)。在诱导培养的第14天,3组OCN、OC、OPN mRNA相对表达量及蛋白含量均高于1、2组(P均<0.05);1、2、3组ALP活性分别为1.00%±0.08%、1.12%±0.09%、2.50%±0.03%,3组高于1、2组(P均<0.05)。结论抑制Scleros-tin表达可以促进BMP-2诱导的人BMSCs的活性及成骨分化能力。
成骨分化、人骨髓间充质干细胞、骨形态发生蛋白2、Sclerostin、碱性磷酸酶
R336(人体生理学)
国家自然科学基金资助项目81271961。
2015-08-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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