人 FGFR4基因重组质粒的构建及融合蛋白的表达

摘要：

目的：探讨成纤维细胞生长因子4（ FGFR4）重组质粒的构建方法，并检测FGFR4融合蛋白的表达。方法从HepG2细胞中提取总RNA，采用RT-PCR方法扩增FGFR4的全长编码序列，双酶切后与pcDNA3．1／Myc-HisA载体连接，构建pcDNA3．1／Myc-HisA-FGFR4重组质粒。重组质粒经双酶切和测序鉴定后瞬时转染人胚肾HEK293细胞，采用Western blot法检测FGFR4融合蛋白的表达。结果 FGFR4编码序列被成功克隆至pcDNA 3．1／Myc-HisA质粒中，成功构建了pcDNA3．1／Myc-HisA-FGFR4载体。转染HEK293细胞后检测到FGFR4融合蛋白的稳定表达，分子量约为89 kD。结论成功构建了FGFR4全长编码基因重组质粒，并检测到转染后FGFR4蛋白在HEK293细胞中的表达。

关键词：成纤维细胞生长因子4、质粒、转染

分类号：Q291

资助基金：黑龙江省卫生计生委科研课题2014-429。

在线出版日期：2015-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：14-16