10.3969/j.issn.1002-266X.2014.47.005
生长因子分步诱导法在大鼠脂肪干细胞向神经细胞分化中的应用观察
目的:观察生长因子分步诱导法在大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向神经细胞分化中的应用效果。方法取SD大鼠腹股沟及腹膜后脂肪,体外分离培养ADSCs,取消化、离心的第3代ADSCs,首先以DMEM/F12+2%B27+20 ng/mL EGF+20 ng/mL bFGF的神经干细胞培养基诱导7 d,后以DMEM/F12+1μmol/L RA神经诱导培养基诱导7 d。免疫荧光法鉴定分化后神经细胞特异标志物中神经细胞特异标志物巢蛋白( Nestin )、微管相关蛋白2(MAP2)、神经元核抗原抗体(NeuN)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结果从大鼠脂肪组织中成功提取AD-SCs,其能够连续传代且稳定增殖;流式细胞检测显示CD34表达率为0.36%,CD73为99.17%,CD90为98.61%,CD105为96.20%。经生长因子诱导7 d后细胞聚集成球,Nestin高表达;14 d后MAP2、NeuN高表达,而GFAP低表达。结论 ADSCs能够稳定增殖传代,生长因子分步诱导可高效诱导ADSCs定向分化为神经细胞。
生长因子、脂肪干细胞、神经细胞
R651.2(外科学各论)
新团队科学基金资助项目WHTD201306。
2015-01-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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