pGPH1-GFP-RKIP 的构建及其对白血病细胞株 CCRF-CEM 化疗敏感性的影响

摘要：

目的：构建Raf 激酶抑制蛋白（ RKIP ）小干扰RNA （ siRNA ）重组质粒pGPH1-绿色荧光蛋白（ GFP ）-RKIP，观察其对白血病细胞株CCRF-CEM化疗敏感性的影响。方法构建RKIP的siRNA重组质粒pGPH1-GFP-RKIP，电穿孔转染至儿童白血病细胞CCRF-CEM，以Western blot法检测细胞RKIP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化核因子κB抑制蛋白（p-IκB）；以不同浓度9-硝基喜树碱（9NC）处理上述细胞，Western blotting法检测细胞RKIP，流式细胞仪法检测细胞caspase-3活性（计算细胞凋亡率），同上检测RKIP表达。结果成功构建pG-PH1-GFP-RKIP；pGPH1-GFP-RKIP和pGPH1-GFP的转染效率分别为90．04％、91．32％；与pGPH1-GFP转染的细胞比较，pGPH1-GFP-RKIP转染的细胞RKIP表达下调，p-ERK、p-IκB表达上调（P均＜0．05）；9NC处理后CCRF-CEM细胞RKIP表达上调、细胞凋亡率下降（P均＜0．05）。结论成功构建了RKIP的siRNA质组质粒，RKIP表达变化可能与白血病细胞化疗敏感性有关。

关键词：Raf激酶抑制蛋白、RNA干扰、儿童白血病、化疗敏感性

分类号：R733.7(肿瘤学)

在线出版日期：2014-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23