10.3969/j.issn.1002-266X.2013.37.004
腺相关病毒载体介导siRNA抑制HBV表达和复制的研究
目的 构建能抑制HBVm RNA表达的siRNA-重组腺相关病毒(rAAV)表达载体,观察重组病毒对HBV的抑制作用.方法 将设计好的siRNA克隆到骨架质粒pAAV-MC中,将该质粒与pAAV-RC和pHelper质粒共同转染人胚肾293T细胞,进行病毒包装.收获并纯化病毒,感染模型细胞HepG2.215,采用ELISA法和荧光定量PCR法检测包装的rAAV-shRNA-GFP病毒抑制HBV情况.结果 经酶切及测序证实,rAAV载体质粒pAAV-shR-NA-GFP构建成功,包装的rAAV-shRNA-GFP病毒感染HepG2.215细胞后,可以抑制HBsAg、HBeAg的表达和HBV的复制.结论 成功制备出rAAV-shRNA-GFP病毒,其能够抑制HBV的表达和复制.
腺相关病毒2、RNA干扰、正嗜肝DNA病毒属、基因疗法
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R39
贵州省中医药管理局基金项目QZYY2010-64
2014-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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12-14,17