成纤维细胞生长因子23蛋白原核表达及条件优化

摘要：

目的 制备具有生物学活性的可溶性重组人成纤维细胞生长因子23(FGF23),并探讨其最佳诱导表达条件.方法 克隆FGF23和SUMO-FGF23两个cDNA序列,分别与原核表达载体pET3c与pET22b相连,转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)和BL21 (DE3)宿主菌中,对FGF23表达的最佳质粒和宿主菌组合进行筛选,并对Rosetta (DE3)/pET22b-SUMO-FGF23重组菌株的最佳诱导表达条件进行优化.结果 只有pET-SUMO-FGF23的质粒和Rosetta(DE3)的组合有FGF23蛋白质表达;融合蛋白在16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导19 h以可溶形式表达,且上清表达量占菌体总蛋白的28％.结论 本研究成功获得了高表达量及可溶性的重组FGF23,最佳表达条件是16℃、0.4 mmol/L IPTG诱导表达19 h.

关键词：重组成纤维细胞因子23、原核构建、诱导表达、条件优化

所属期刊栏目：53

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家863计划项目2011AA02A113;温州市2010年第四期科技计划项目资助课题2010X0029

在线出版日期：2014-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-7