10.3969/j.issn.1002-266X.2013.23.001
细胞外段V/VC1区缺失RAGE真核表达载体的构建、转染及在前列腺癌细胞中的表达和定位
目的 构建带HA标签的晚期糖基化终产物受体(RAGE)不同功能段缺失体真核细胞表达载体,使其在前列腺癌细胞株PC-3中过表达并观察其定位.方法 采用PCR方法扩增缺失不同功能段V/VC1的RAGE缺失体△V/△VC1序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中,利用PCR和测序鉴定克隆正确性;转染PC-3细胞,用Western blot法检测其表达,免疫荧光法检测其在细胞中的定位.结果 RAGE不同缺失体质粒经测序鉴定无误,并可在PC-3细胞中高表达,且经免疫荧光检测其主要在细胞质中表达.结论 成功构建了RAGE不同缺失体的真核表达载体,转染PC-3细胞后呈高表达,其在PC-3细胞中主要定位于细胞质.
晚期糖基化终产物受体、缺失体、真核表达载体、前列腺癌
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R737.25(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81072092;广东省自然科学基金资助项目10151051501000072;广东省科技计划项目2012B031800302
2013-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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