低密度培养兔骨髓基质干细胞的生物学特性
目的 探讨低密度体外培养条件下兔骨髓基质干细胞的成骨能力及对Bio-oss胶原复合的影响.方法 利用全血贴壁法培养兔骨髓基质干细胞,取第2代细胞进行不同密度的培养,观察细胞克隆的形成及形态变化.细胞消化后进行爬片,测定Stro-1+、CD44+细胞表面抗原,以流式细胞仪检测正常培养细胞CD34+、CD44+表达变化并与非低密度培养组比较.低密度培养细胞成骨诱导后,进行钙化结节诱导,同时进行碱性磷酸酶(ALP)定量测定.把诱导后的细胞与Bio-oss胶原复合,观察与载体材料的生物相容性并进行电镜扫描观察.结果 低密度培养的细胞可形成克隆,细胞爬片后CD44+、Stro-1+免疫荧光测定显示阳性,钙化结节在成骨诱导14 d后形成.低密度培养的细胞CD34+阳性率为43.83%,而正常培养的细胞CD34+阳性率为4.20%,二者间有统计学差异(P<0.05).诱导后细胞ALP定量测定为(1.666±0.015) U/(g·prot),而非诱导细胞为(0.450±0.023) U/(g·prot),二者间有统计学差异(P<0.05).诱导后的细胞与Bio-oss胶原复合较好,电镜扫描观察细胞表面有大量“伪足”形成.结论 低密度培养的骨髓基质干细胞可表达较强干细胞特性和成骨能力,与Bio-oss胶原复合后生长良好.
干细胞、低密度培养、骨生成、Bio-oss胶原、兔
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R329.2(人体形态学)
山东省卫生厅立项课题2009HW094
2013-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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