体外高效诱导人胚胎干细胞定向分化为胰岛细胞的可行性研究
目的 探讨体外诱导人胚胎干细胞(hESs)定向分化为胰岛细胞的可行性.方法 体外分三阶段诱导hESCs定向分化为胰岛细胞.第一阶段:予以活化素-A、渥曼青霉素诱导分化形成定型内胚层;第二阶段:采用维甲酸(RA)、NOGGIN、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导胰腺细胞定向分化;以EGF扩增胰腺祖细胞;第三阶段:采用尼克酰胺、唾液素4、bFGF及骨形成蛋白(BMP4)促进胰岛细胞成熟;观察诱导各阶段细胞形态变化,免疫荧光法鉴定胰十二指肠同源异型盒基因( PDX-1)、胰高糖素、胰岛素、C肽、葡萄糖转运子2(glut-2)表达.结果 诱导14 d时hESs出现胰高糖素荧光表达;20 d时细胞出现PDX-1和C肽共表达;22 d形成的成熟胰岛细胞出现glut-2和胰岛素的阳性表达;胰岛素阳性细胞占17.1%,C肽阳性细胞占3.8%.结论 体外可简单高效的诱导hESs定向分化为成熟胰岛细胞.
胚胎干细胞、分化、胰岛细胞、胰岛素、C肽
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R363(病理学)
烟台市科学技术发展计划资助项目2008142-9,2011204
2013-01-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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