结缔组织生长因子腺病毒载体的构建及其对血管平滑肌细胞迁移的影响

摘要：

目的 构建结缔组织生长因子(CTGF)腺病毒载体并观察其对血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响.方法 将CTGF基因整合入腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CTGF,线性化后与pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得含目的基因的重组体质粒pAd-CTGF,酶切后用转染HEK293细胞包装成重组体腺病毒Ad-CTGF,扩增和纯化后PCR鉴定.应用Ad-CTGF感染VSMCs,划痕实验观察上调CTGF表达对VSMCs迁移的影响.结果 Ad-CTGF感染HEK293细胞后,随时间增加HEK293细胞表达绿色荧光的量也增加.PCR鉴定重组腺病毒Ad-CTGF电泳结果显示,1047 bp附近有一条带,与目的片段相符合,CTGF碱基序列经测序正确.Ad-CTGF感染VSMCs后CTGF高表达,创口愈合指数明显提高,VSMCs迁移受到明显提升.结论 成功构建了携带CTGF基因的重组腺病毒载体,上调CTGF表达可以明显增加VSMCs的迁移能力.

关键词：结缔组织生长因子、腺病毒、载体、血管平滑肌细胞、迁移

所属期刊栏目：52

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目39071023;辽宁省博士启动项目20071098;辽宁医学院青年科技启动基金项目Y2010Z010;辽宁医学院第一临床学院青年科技启动基金项目2010C01

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：30-32,35