RNA干扰沉默CyclinD1基因对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨以细胞周期蛋白(Cyclin) D1为靶基因的RNA干扰对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响,为胰腺癌的靶向治疗提供依据.方法 用含有10％ FBS的DMEM培养液在37℃、5％CO2培养箱中常规培养AsPC-1细胞,至对数生长期后接种于96孔培养板中,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并采用LipofectamineTM2000脂质体分别转染Cyclin D1-小干扰RNA(siRNA)、阴性对照siRNA、脂质体,48 h时收集细胞.应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞体外增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率(AI).结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达均明显下调,细胞生长速度明显减慢,Go/G1细胞比例显著增大、S期细胞比例则明显降低、AI显著升高(P均＜0.01).结论 Cyclin D1-siRNA能通过沉默靶基因表达抑制AsPC-1细胞生长、改变细胞周期分布、诱导细胞凋亡,可作为胰腺癌基因治疗的一个有效靶点.

关键词：胰腺肿瘤、胰腺癌、Cyclin D1基因、RNA干扰、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：51

分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：江西省卫生厅科技计划资助项目20061054

在线出版日期：2012-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：20-22