pAd-shRNA-IGF-1对SD孕鼠背根神经节神经元突起生长的影响

摘要：

目的 观察重组腺病毒介导的干扰胰岛素样生长因子1(IGF-1)的短发夹RNA(shRNA)对SD孕鼠背根神经节神经元(DRGn)突起生长的影响.方法 设计、合成三对靶向IGF-1的单链寡核苷酸,经变性、退火为双链寡核苷酸并插入pENTR/U6质粒载体；测序正确后经LipofectamineTM2000转染胰腺癌MIA PACA-2细胞,采用RT-PCR法选出对IGF-1干扰效果最佳的pENTR/U6-shRNA-IGF-1质粒,将其与pAd/BLOCK-iTTM-DEST骨架质粒同源重组,用HEK293A细胞包装出表达shRNA-IGF-1的重组腺病毒后测定病毒滴度.将pAd-shRNA-IGF-1感染MIA PACA-2细胞,采用免疫细胞化学法检测细胞内的IGF-1.将构建的pAd-shRNA-IGF-1感染MIA PACA-2细胞,然后与SD孕鼠DRGn体外共培养,显微镜下观察其形态变化及生长情况.结果 与未感染pAd-shRNA-IGF-1的MIA PACA-2细胞共培养的DRGn,其突起逐渐增多并相互连接成网状,形成稀疏的神经网络；而与感染pAd-shRNA-IGF-1的MIA PACA-2细胞共培养的DRGn,其细胞数量较前稍减少,并没有形成网状结构,只见到少量小的神经突起.结论 pAd-shRNA-IGF-1可抑制SD孕鼠DRGn轴突的生长.

关键词：腺病毒、胰岛素样生长因子-1、短发夹RNA、神经元、轴突、胰腺癌

所属期刊栏目：51

分类号：R735.9(肿瘤学)

在线出版日期：2011-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：27-29