人胆固醇醋水解酶真核表达载体的构建及U937细胞系的转染

摘要：

目的 构建人胆固醇酯水解酶(hCEH)绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-N1-hCEH,并观察其转染单核巨噬细胞株U937后,细胞中hCEH的表达情况.方法 以人肝细胞L-02总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hCEH编码区序列,将扩增片段插入到pMD19-T载体中,回收、纯化目的 片段后亚克隆到pEGFP-Nl真核表达载体上,经双酶切、测序鉴定后,转染U937,观察U937中绿色荧光蛋白的表达情况.结果 RT-PCR扩增hCEH基因的编码区序列获得1条约1.7kb的片段,与预期片段大小相符;以pEGFP-Nl为载体,成功构建重组表达质粒pEGFP-Nl-hCEH,该质粒可以在U937中表达.结论 成功构建pEGFP-N1-hCEH,用其转染U937后,细胞中pEGFP-Nl-hCEH大量表达.

关键词：人胆固醇酯水解酶、真核表达载体、单核巨噬细胞、U937细胞、转染

所属期刊栏目：51

分类号：R543.5(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30971023;辽宁省自然科学基金资助项目20092190;辽宁省教育厅高等学校科研项目2009A481

在线出版日期：2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：14-16