hPRA、hPRB真核表达载体及其转基因人子宫内膜癌细胞系的构建

摘要：

目的 构建人孕激素受体(hPR)亚型hPRA、hPRB真核表达载体,并以此建立表达不同hPR亚型的人子宫内膜癌细胞系.方法 构建真核表达载体pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB,采用脂质体介导法转染hPR阴性的人子宫内膜癌细胞系HECCA,将HECCA分3组,前2组分别转染pcDNA3.1-hPRA、pcDNA 3.1-hPRB,同时转染两种质粒.Western blot技术检测转染细胞中hPRA、hPRB的表达.结果 经限制性内切酶鉴定及序列分析,pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB构建正确.pcDNA3.1-hPRA、pcDNA3.1-hPRB成功转染HECCA后,在HECCA中检测出了hPRA、hPRB表达,建立了3株转染细胞:HECCA-A只表达hPRA,HECCA-B只表达hPRB,hECCA-AB表达hPRA及hPRB.结论 成功构建了hPRA、hPRB真核表达载体,载体转染后的HECCA能分别稳定表达hPRA、hPRB,建立了表达不同hPR亚型的人子宫内膜癌细胞系.

关键词：子宫内膜肿瘤、孕激素受体、质粒、转染、细胞系

所属期刊栏目：51

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金资助项目Y2007C146

在线出版日期：2011-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：24-26