含hTERT启动子、PE38KDEL片段质粒构建及其对人胰腺癌细胞凋亡的影响

摘要：

目的 构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响.方法 采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10% FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数.结果 重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致.A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E组与A组比较,P均<0.05;E组与D组比较,P<0.05.结论 成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡.

关键词：胰腺癌、人端粒酶反转录酶、启动子、铜绿假单胞菌外毒素、绿色荧光蛋白、基因疗法

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分类号：R753.9(皮肤病学与性病学)

资助基金：教育部博士点基金资助项目20060062008;天津市自然科学基金自助项目07JCYBJC10300

在线出版日期：2010-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4-6