稳定表达乙型肝炎病毒X基因肝细胞株的构建

摘要：

目的 构建稳定表达乙型肝炎病毒X基因(HBVx)的正常人肝细胞株.方法 用PCR法扩增含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的X基因序列,构建HBVx基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBVx,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并对其进行双酶切和测序鉴定;用脂质体转染法将HBVx基因导入Chang细胞系,G418筛选,RT-PCR和Western blot鉴定.结果 X基因亚克隆入pcDNA3.1(+),含有完整的X基因片段,转染后Chang细胞有HBVx mRNA表达,Chang/HBVx有HBVx蛋白的表达.结论 构建了稳定表达HBVx基因的肝细胞株Chang/HBVx.

关键词：肝细胞、乙型肝炎病毒X基因、真核表达载体、转基因细胞模型

所属期刊栏目：50

分类号：R735.7(肿瘤学)

在线出版日期：2010-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：10-11