FasL基因siRNA真核表达载体的构建及意义

摘要：

目的 构建针对细胞凋亡基因FasL的小干扰RNA(siRNA)表达载体,探讨载体介导的RNA干扰技术用于肺间质纤维化基因治疗的可行性.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以FasL mRNA为靶基因,合成两对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成DNA双链,再克隆至siRNA表达载体pSilencer2.0中,转化后进行PCR鉴定和DNA序列测定.将构建的载体用脂质体介导转染入人肺腺癌A549细胞株,采用实时荧光定量PCR法检测细胞FasL mRNA水平变化.结果 成功构建发卡样FasL siRNA真核表达载体;其转染人肺腺癌A549细胞后,细胞FasL mRNA的表达水平显著下降.结论 FasLsiRNA真核表达载体能显著抑制人肺腺癌A549细胞FasL mRNA的表达;本研究为肺间质纤维化的基因治疗奠定了基础.

关键词：FasL基因、RNA干扰、表达载体

所属期刊栏目：49

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2009-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：35-37