抗TNF-α蛋白Fab抗体的制备和鉴定

摘要：

目的 制备人源性抗肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白的可溶性Fab抗体.方法 用固相化的TNF-α蛋白从人天然Fab噬菌体抗体库中筛选出表达抗TNF-α蛋白Fab抗体的阳性克隆,经酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG高效可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定抗体表达情况,ELISA鉴定其抗原结合活性和特异性.结果 筛选并表达了人源性抗TNF-α蛋白的Fab抗体,在非还原SDS-PAGE中形成相对分子质量47 kD的条带;Westem blot分析证实表达的蛋白即Fab抗体;ELISA筛选出的2株抗体(TA-04、TA-13)具有良好的抗原特异性和抗原结合活性,与小牛血清白蛋白无交叉反应.结论 成功制备并鉴定了人源性抗TNF-α蛋白的可溶性Fab抗体.

关键词：噬菌体抗体库、抗原结合片段、肿瘤坏死因子-α

所属期刊栏目：48

分类号：R730.51(肿瘤学)

资助基金：天津市自然科学基金资助项目043608411

在线出版日期：2009-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：14-16