靶向Akt2基因RNA干扰重组表达载体的构建和测序

摘要：

目的 利用RNA干扰技术,以Akt2为靶基因,设计并构建重组表达载体,并进行测序鉴定.方法 利用GenBank中已知Akt2的mRNA基因序列设计具有短发夹结构的两条寡核甘酸序列,经退火形成互补双链,与pGEM-T Easy载体进行连接,经蓝白筛选后以T7和SP6为引物进行PCR鉴定,对表达载体pRNAT-U6.2及亚克隆产物进行双酶切,将得到的基因及线性化的表达载体再次连接,利用PCR方法进行重组体的筛选鉴定并进行测序分析.结果 将合成的DNA序列克隆到表达载体上,经PCR扩增筛选鉴定和测序鉴定证实为所需序列.结论 Akt2靶向RNA干扰重组表达载体构建成功.

关键词：Akt2基因、RNA干扰、重组表达载体

所属期刊栏目：48

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

资助基金：河南省卫生厅科技攻关课题20060035

在线出版日期：2008-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：19-21