10.3969/j.issn.1002-266X.2008.26.010
人宫颈癌基因表达载体的构建及其在肝癌相关研究中的价值
目的 为人宫颈癌基因(HCCR)在肝癌发生、发展中的生物学效应及机制研究提供理想工具.方法 培养人HepG2细胞,RT-PCR扩增出HCCR基因片段,将其连接到pCR T7 TOPO TA/NT克隆载体中,命名为pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR.运用交叉引物PCR筛选正确连接的克隆.再用EcoR I和BamH I限制性内切酶酶切鉴定和测序验证.将其转化BL21细菌,用IPTG诱导其表达相应的蛋白质,并用Western blotting验证.结果 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR原核表达载体构建成功.酶切鉴定和测序均与预期一致.用IPTG诱导转化此质粒后的BL21细菌,得到相应大小的蛋白质.结论 pCR T7 TOPO TA/NT-HCCR 原核表达载体构建成功;其可作为HCCR基因功能研究及其与肝癌相关性研究的理想工具.
基因克隆、逆转录聚合酶链反应、人类宫颈癌癌基因、肝肿瘤、肝癌
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R735.7(肿瘤学)
南京市卫生局课题资助项目YKK05123
2008-11-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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