人α-防御素基因的克隆及其在293T细胞中表达的临床意义

摘要：

目的 克隆人α-防御素(α-HNP)基因,构建重组真核表达质粒pCG-HNP并检测其在293T细胞中的表达.方法 提取人PBMC细胞的RNA,以其为模板用RT-PCR技术克隆人α-HNP的cDNA,并将其插入质粒pCG中构建真核表达载体.测序证实后,将重组质粒用脂质体法转染293T细胞,用蛋白质免疫印迹法(Western)检测目的蛋白分子的表达.结果 测序证实克隆的人α-HNP阅读框正确完整,PCR鉴定和酶切鉴定证实插入方向正确,免疫印迹结果显示重组质粒能够在293T细胞中表达HNP-GFP-Flag融合蛋白.结论 α-HNP基因成功克隆;其在293T细胞中的表达可为进一步研究其抗HIV活性奠定基础.

关键词：防御素、293T细胞、真核表达

所属期刊栏目：47

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省自然科学基金06300563

在线出版日期：2007-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：10-12