10.3969/j.issn.1002-266X.2007.04.008
小鼠免疫共刺激信号B7-1和B7-2联合表达载体的构建及包装
目的 构建含小鼠B7-1和B7-2基因的双表达载体pLXSN-mB7-1-IRES-mB7-2,并包装到PA317细胞中.方法 ①将EcoRI和BamHI酶切下来的pMD18-mB7-2质粒上的mB7-2基因片段克隆到含有IRES片段的MINV质粒上,得到MINV-IRES-mB7-2载体;②MunI酶切载体MlNV-IRES-mB7-2,末端钝化,然后BamHI再酶切,得到含钝末端和BamHI粘末端的IRES-mB7-2基因片段;③XhoI酶切质粒pLXSN-mB7-1,末端钝化,然后BamHI再酶切,形成含钝末端和BamHI粘末端的开环pLXSN-mB7-1质粒,将IRES-mB7-2基因片段插入其中,得到pLXSN-mB7-1-IRES-mB7-2双表达载体;并PA317细胞包装,PCR和电镜鉴定.结果 经酶切、PCR、测序等鉴定载体构建成功,并包装到PA317细胞内.结论 成功得到了双表达载体pLXSN-mB7-1-IRES-mB7-2和包装后的PA317/mB7-1-mB7-2细胞.
载体构建、鉴定、病毒包装、pLXSN-mB7-1-IRES-mB7-2
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R3(基础医学)
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金02BS095
2007-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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