反义DNA甲基化酶3b基因片断真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的构建反义DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因片断真核表达载体,为研究DNMT3b基因功能提供工具.方法根据DNMT3b基因cDNA序列中编码序列设计PCR引物,在上下游引物5′端分别添加XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点,RT-PCR从胆管癌细胞QBC-939中获得485bp的DNA片断;将该片断反向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)的多克隆位点,构建反义DNMT3b基因片断真核表达载体,并用PCR、酶切法和DNA测序鉴定.结果 PCR鉴定得到467bp特异条带,双酶切鉴定得到471bp片断和5.4kb载体片断,DNA测序说明插入片断序列正确.结论本研究构建的反义DNMT3b基因片断真核表达载体可为进一步研究DNMT3b基因功能提供实验工具.

关键词：DNMT3b、反义技术、表达载体、基因克隆、DNA甲基化

所属期刊栏目：45

分类号：R394-33

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：7-9