长链非编码RNA ZNF528-AS1促进乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA ZNF528-AS1对乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移的影响及潜在调控机制.方法 利用RNA-seq高通量测序技术分析乳腺癌他莫昔芬耐药细胞/成瘤组织与亲本细胞/成瘤组织间差异表达的lncRNA,筛选与乳腺癌他莫西芬耐药相关的候选lncRNA,利用实时定量PCR(qRT-PCR)技术验证候选lncRNA的表达.通过脂质体转染乳腺癌细胞,构建过表达及敲低ZNF528-AS1的细胞模型.利用细胞增殖实验、克隆形成实验、成球实验、5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测ZNF528-AS1对乳腺癌细胞增殖、肿瘤干性及他莫昔芬耐药性的影响.Transwell迁移和侵袭实验检测ZNF528-AS1对乳腺癌细胞转移能力的影响.利用RNA-seq高通量测序及生物信息学分析技术寻找ZNF528-AS1的下游调控通路,并通过Western blotting及细胞功能实验等进行验证.结果 RNA-seq高通量测序分析筛选出了在他莫昔芬耐药细胞/成瘤组织与亲本细胞/成瘤组织间差异表达的lncRNAs.qRT-PCR实验结果证实了差异lncRNA的表达,并发现ZNF528-AS1在他莫昔芬耐药细胞中的表达上调最为明显.在乳腺癌细胞中过表达ZNF528-AS1能够提高细胞的增殖水平、克隆形成能力、肿瘤干性及对他莫昔芬的耐药性.此外,过表达ZNF528-AS1可增强乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力.相应地,在乳腺癌细胞中敲低ZNF528-AS1能够降低细胞的增殖、他莫昔芬耐药性、肿瘤干性、迁移及侵袭等能力.RNA-seq高通量测序结合生物信息学分析结果显示,过表达ZNF528-AS1能够参与调控转化生长因子-β(TGF-β)信号通路.Western blotting结果证实ZNF528-AS1能够同时激活经典和非经典TGF-β信号通路.TGF-β通路抑制剂SB431542能够逆转ZNF528-AS1过表达增强的细胞增殖、迁移及侵袭能力.结论 ZNF528-AS1能够促进乳腺癌他莫昔芬耐药及进展转移,其作用机制可能与激活TGF-β通路有关.

关键词：乳腺癌、ZNF528-AS1、他莫昔芬耐药、肿瘤干性、进展转移

所属期刊栏目：61

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：中国博士后科学基金2017M612292

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：17-26