抑制EZH2基因表达的shRNA载体的构建及其作用

摘要：

目的 构建zeste基因增强子同源物2(EZr2)靶向的小发夹RNA(shRNA)重组表达载体,探讨抑制EZH2基因表达后其在结直肠癌细胞中的作用.方法 根据EZH2cDNA序列设计具有短发夹结构的两条DNA序列,与载体pGFP-V-RS构建重组表达载体,鉴定后转染至SW480细胞.将其随机分为阴性对照组和基因沉默组,RT-PCR和蛋白质印迹法检测抑制效果,MTT法检测细胞增殖情况.结果 成功构建了抑制EZH2基因表达的干扰质粒.阴性对照组EZH2 mRNA的表达是基因沉默组的5.8倍(P＜0.01),基因沉默组EZH2的蛋白明显低于阴性对照组(P＜0.05).与阴性对照组相比,基因沉默组细胞生长受到明显抑制(P＜0.05).结论 EZH2靶向shRNA重组表达载体构建成功,并能显著抑制EZH2基因的表达,为进一步研究EZH2基因在肿瘤中的作用机制提供了基础.

关键词：EZH2基因、RNA干扰、SW480细胞、蛋白质印迹法、MTT法

所属期刊栏目：51

分类号：R735.3(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金;济南市青年科技明星计划

在线出版日期：2016-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：31-34