双氢青蒿素对肝癌HepG2细胞VEGF及HUVECs血管新生的影响

摘要：

目的:探究双氢青蒿素(DHA)对肝癌HepG2细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达及DHA+肿瘤条件培养基(TCM)对内皮细胞血管生成的影响.方法:将乏氧条件培养的人肝癌细胞系HepG2分为空白组、不同浓度(10 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L和100 μmol/L)DHA组,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和酶联免疫吸附测定(ELISA)分别检测DHA对VEGF mRNA、蛋白和分泌水平及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的影响.选取具有有效抑制作用的最低浓度25μmol/L DHA进行后续实验,将细胞分为4组:空白组、DHA+TCM组、PX-478+TCM组和PX-478+DHA+TCM组.收集各组培养肝癌HepG2细胞的TCM,各组TCM用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验、划痕实验和成管实验分别检测DHA+TCM对HUVECs增殖、迁移和血管形成的影响,揭示DHA对VEGF作用的机制.结果:DHA呈剂量依赖性地抑制肝癌HepG2细胞VEGF mRNA、蛋白及分泌水平的表达;DHA+TCM可有效抑制HUVECs增殖、迁移及血管生成;此外,DHA对肝癌HepG2细胞中HIF-1α蛋白表达具有抑制作用.DHA+TCM对HUVECs血管生成的抑制作用可通过DHA与PX-478共处理而消除.结论:DHA可以抑制肝癌HepG2细胞VEGF表达及HUVECs血管生成,其机制可能是通过减少肝癌HepG2细胞转录因子HIF-1α的表达.

关键词：双氢青蒿素、血管新生、肝癌HepG2细胞、缺氧诱导因子-1α、血管内皮生长因子、四甲基偶氮唑蓝实验、划痕实验、成管实验

所属期刊栏目：46

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：山东省中医药科技发展计划项目2019-0370

在线出版日期：2022-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：524-532,548