小鼠髓源性树突状细胞分离培养及鉴定

摘要：

目的 建立小鼠髓源性树突状细胞分离培养及鉴定方法.方法 取小鼠股骨和胫骨骨髓细胞,使用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(recombinant granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rmGM-CSF)20 ng·mL-1联合白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)10 ng·mL-1诱导小鼠骨髓前体细胞分化为树突状细胞(dendritic cell).体外培养 10 d,使用流式细胞术鉴定细胞表面树突细胞特异性标志物CD11c、MHCⅡ、CD80、CD86、CD40 及CCR7 的表达.进一步使用OVA257-264多肽处理细胞 48 h,流式细胞术分析该多肽与MHC I形成的复合物的表达,验证该细胞的抗原提呈功能.结果 依据本文方法,培养第 10 天每只小鼠可获得 1.5×107～2×107个细胞.其中,38.4％细胞表达CD11c,CD11c阳性的细胞中有 15.2％细胞表达 MHCⅡ、32.3％细胞表达 CD80、7.22％细胞表达CD86,但CD11c阳性的细胞中CD40 阳性细胞仅 4.15％,CCR7 阳性细胞仅 1.83％.LPS刺激 24 h后,58.1％细胞表达CD11c,CD11c阳性的细胞中有39.8％细胞表达MHCⅡ,38.6％细胞表达CD80,43.1％细胞表达CD86,30.2％细胞表达CD40,10.2％细胞表达CCR7.使用该方法培养的树突细胞具有较强的抗原提呈能力.结论 本试验成功建立体外培养树突细胞的方法,可为基于树突细胞的基础研究和转化应用提供实验基础.

关键词：小鼠骨髓细胞、树突状细胞、鉴定

所属期刊栏目：42

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金No.82003288

在线出版日期：2023-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：89-94