猪干扰素-γcDNA的克隆和原核表达

摘要：

目的 克隆猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,以实现猪干扰素-γ的大量生产.方法 收集转染细胞(CHO-PCI-neo-PoIFNγ),用UNIQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒提取总RNA,并通过RT-PCR的方法扩增获得猪干扰素-γcDNA基因.将获得的猪干扰素-γcDNA基因克隆入原核表达载体pBV220中,组装成原核表达载体pBV220-cPoIFNγ.将这个表达载体转化入大肠杆菌表达菌株DH5α和BL21中,温度诱导培养后,进行SDS-PAGE实验检测.结果 特异表达带约在17KD的位置,并证实在菌株DH5α和BL21中的表达量没有明显的差异,其表达量都约占细菌总蛋白的15%.结论 成功地进行了猪的干扰素-γcDNA,并进行原核表达,为猪干扰素-γ的大量生产提供了可能.

关键词：猪干扰素γ、RT-PCR、原核表达载体

所属期刊栏目：27

分类号：TQ460.38

在线出版日期：2008-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：240-242