山茱萸环烯醚萜苷对蛋白磷酸酶2A催化亚基C磷酸化的调节机制

摘要：

目的 探讨山茱萸环烯醚萜苷(Cornel iridoid glycoside,CIG)上调蛋白磷酸酶2A (protein phosphatase 2A,PP2A),PP2A活性抑制tau蛋白磷酸化的作用机制.方法 ①确定最佳转染条件:将Src质粒DNA(0.2、0.4、0.6、0,8 μg)瞬时转染入小鼠神经瘤母细胞(Neuro-2A cell,N2a细胞),观察不同量Src对PP2A催化亚基C磷酸化和tau蛋白磷酸化的影响;②将0.6μg Src质粒DNA转染入N2a细胞,24 h后加入CIG(50、100、200 μg/mL)共同孵育24 h,观察CIG对Src、蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B(proteintyrosine phosphatase 1B,PTP1B)、p-PP2Ac及tau蛋白磷酸化的作用.结果 ①转染Src(0.2、0.4、0.6 μg)质粒DNA到N2a细胞,Src蛋白表达明显增加,p-PP2Ac水平上调,PP2Ac蛋白总量表达无变化,tau蛋白在Ser 199/202、Ser396位点磷酸化显著增加;转染0.8 μg Src质粒DNA到N2a细胞与转染0.6μg Src相比,p-PP2Ac表达下降,PP2 Ac蛋白总量表达无变化,tau蛋白在Ser 199/202、Ser396位点磷酸化降低.②转染0.6μg Src质粒DNA到N2a细胞,Src蛋白表达增加,p-PP2Ac表达增加,tau蛋白在Ser199/202、Thr 205、Thr 217以及Ser 396位点的磷酸化明显增加;CIG对Src蛋白表达无影响,能够抑制p-PP2Ac的表达,抑制tau蛋白在Ser 199/202、Thr 205、Thr 217以及Ser 396位点的磷酸化.此外,CIG能上调PTP1B蛋白表达.结论 CIG对Src蛋白无明显调节作用,但能通过增加PTP1B的表达,降低PP2A催化亚基C磷酸化,从而升高PP2A活性,进一步降低tau的过度磷酸化.CIG对tau蛋白过度磷酸化的抑制作用,将会给阿尔茨海默病的治疗带来广阔的应用前景.

关键词：山茱萸环稀醚萜苷、蛋白酪氨酸激酶Src、蛋白磷酸酶2A、蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B、tau蛋白、阿尔茨海默病

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分类号：R96(药理学)

资助基金：国家自然科学基金81473373;北京市自然科学基金7132110;“重大新药创制”科技重大专项2015ZX09101016001;北京市卫生系统高层次卫生技术人才2014-2-014;北京市新世纪百千万人才工程008-0014;北京市教委新医药学科群XK100270569.This study was supported by National Natural Science Foundation of China81473373;Natural Science Foundation of Beijing7132110;Major Project for Essential Drug Research and Development2015ZX09101016001;Beijing Health and Technical High-level Personal Plan2014-2-014;Beijing New Century Talented Person Project008-0014;New Medical Disciplines Project of Beijing Education CommitteeXK100270569

在线出版日期：2017-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：777-783