复制性衰老减弱人胚骨髓间充质干细胞静脉移植治疗大鼠脑梗死的疗效

摘要：

目的：比较不同代次的人胚胎骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells，BM-MSCs）移植治疗大鼠脑梗死模型的疗效，包括梗死体积和行为学改变以及疗效产生机制，包括对梗死区激活的小胶质细胞的抑制、产生营养性细胞因子上的差别。方法体外培养人胚胎骨髓来源间充质干细胞，并通过连续传代制作复制性衰老模型。分别收集传第4代和第10代的MSC用于移植。制作大鼠大脑中动脉远端阻塞（ distal middle cerebral artery occlusion，dMCAO）脑梗死模型。实验分假手术组（无脑梗死）、缺血对照组〔脑梗死模型给予0．9％（质量分数）氯化钠注射液〕和MSC细胞治疗组。移植组在造模后1 h经尾静脉移植1×106不同代次的BM-MSC，移植后2、4 d进行行为学评价；移植后2 d部分动物进行梗死体积测定；部分动物灌注取脑，免疫组织化学法计数并对比皮质梗死区激活的小胶质细胞CD68染色的数量；另一部分动物于移植4 d用ELISA法检测梗死灶区域大鼠来源的脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）、胰岛素样生长因子（insulin like growth factor-1，IGF-1）的浓度。结果只有第4代人BM-MSC能够有效减少梗死体积，并在移植后第2天改善脑梗死模型动物的神经功能。移植后第4天，仅第4代BM-MSC移植组脑内BDNF、IGF-1蛋白浓度明显高于缺血对照组，小胶质细胞激活明显低于对照组；第10代MSC对营养性细胞因子和小胶质细胞的影响和缺血对照组相比，差异无统计学意义。结论脑梗死后1 h移植早代次的BM-MSCs会产生减小梗死体积、改善动物行为的作用，但晚代次细胞的作用不明显，原因可能和晚代次细胞促进脑内神经营养因子表达，抑制脑内小胶质细胞激活的能力下降有关。

关键词：脑梗死、间充质干细胞、小胶质细胞、细胞因子、移植

分类号：R392.2+8

资助基金：北京市科委健康培育项目Z111107067311033;杭州市卫生局重点项目2011Z007。 This study was supported by The Health Cultivation Project of Beijing Municipal Science and Technology CommissionZ111107067311033;Key Project of Hangzhou Public Health Bureau 2011Z007．

在线出版日期：2016-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：865-874