10.3969/j.issn.1006-7795.2013.01.020
GAP-43高表达转基因小鼠的建立
目的 构建GAP-43(growth associated protein-43)高表达转基因小鼠,为进一步研究GAP-43对神经发生及损伤修复的作用机制提供基础.方法 构建pCEP4-PDGF-GAP-43转基因构件,通过原核显微注射方法将线性化、纯化后的外源质粒pCEP4-PDGF-GAP-43 注射入C57小鼠受精卵中,胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内,获得子代小鼠.用PCR方法检测子代鼠尾基因组DNA,通过Western blotting法检测GAP-43基因表达,并通过免疫荧光的方法对GAP-43表达位置进行定位.结果 经PCR方法检测得到转基因阳性鼠,Western blotting结果显示 GAP-43蛋白的表达量高于同胞对照组的小鼠且差异有统计学意义,免疫荧光染色结果显示GAP-43阳性反应物弥散分布于大脑皮质和海马中,且特异性存在于神经元中.结论 外源基因GAP-43在小鼠基因组中得到整合并稳定遗传,为神经损伤修复及神经发育的相关研究提供了有价值的动物模型.
GAP-43、转基因小鼠、胚胎显微注射
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Q789(基因工程(遗传工程))
国家重点基础研究发展计划资助项目2007CB947704
2013-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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