Bβ448野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系的建立

摘要：

目的 构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础.方法 以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A).应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达.结果 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功.结论 野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础.

关键词：纤维蛋白原、定点突变、稳定转染细胞系

所属期刊栏目：33

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划项目2009CB522107;国家自然科学基金国际地区合作与交流30810103904;国家自然科学基金81070042;北京市自然科学基金7082012

在线出版日期：2012-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：187-192