宫颈上皮内瘤变与正常宫颈组织差异表达蛋白分析

摘要：

目的 探讨蛋白质组学方法筛查正常宫颈与宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织中的差异表达蛋白质标志物,为研究CIN发生的分子机制及临床诊治工作提供依据.方法 收集2008年8月至2009年9月间首都医科大学附属北京妇产医院妇瘤科收治的正常子宫颈组织因子宫肌瘤手术行全子宫切除术患者9例为对照组、CIN组织23例(其中CINⅠ 7例、CINⅡ8例、CINⅢ8例).应用二维荧光差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis,2-DDIGE)及DeCyder软件寻找差异表达蛋白质点,基质辅助激光解析飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)分析差异蛋白质点,数据库搜索鉴定差异表达最明显的S100蛋白家族A9 (S100 calcium-binding protein A9,S100A9),真核延长因子1α1(eukaryotic elongation factor 1-alpha-1,eEF1A1)及丙酮酸激酶M2 (pyruvate kinase M2,PKM2)3种蛋白质；应用免疫组织化学法( immunohistochemistry,IHC)(其中正常宫颈组织10例、CIN Ⅰ 10例、CINⅡ10例、CINⅢ10例)及蛋白印记法(Western blotting)(其中正常宫颈组织12例,CIN Ⅰ～Ⅱ12例,CINⅢ12例)进一步验证上述3种蛋白在CIN组织和正常宫颈组织的表达差异.结果 获得CIN组织与正常宫颈组织2-D DIGE图,成功鉴定25个蛋白；免疫组化及蛋白印迹验证结果提示:S100A9蛋白表达于细胞质中,在CIN中表达水平高于正常组,差异有统计学意义(P=0.010)；eEF1A1蛋白表达于细胞质中、PKM2蛋白表达于细胞核中,2者在CIN中表达水平均低于正常组,差异有统计学意义(P分别为0.352,0.000).结论 在正常宫颈组织与CIN组织之间存在差异蛋白质表达,S100A9蛋白可能成为辅助诊断CIN的相关标志物,PKM2蛋白可能成为抑制CIN发生的蛋白质,并可根据2种差异蛋白表达预测CIN的发生发展.

关键词：蛋白质组学、宫颈上皮内瘤变、二维荧光差异凝胶电泳、基质辅助激光解析飞行时间串联质谱

所属期刊栏目：33

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：北京市教育委员会科技发展计划KM200910025025

在线出版日期：2012-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：36-44