10.3969/j.issn.1006-7795.2011.01.021
COX-2诱饵载体的构建及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测
目的 构建环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的诱饵载体,为应用酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)筛选与COX-2相互作用的蛋白建立实验基础.方法 PCR扩增COX-2基因编码区全长,引入酶切位点EcoRⅠ、BamHⅠ,将COX-2基因克隆至载体pGBKT7中,将构建好的诱饵载体pGBKT7-COX-2转化到酵母细胞Y190中,检测pGBKT7-COX-2在Mathmaker GAL4 Two-Hybrid System 3中有无自激活作用.结果 成功扩增了COX-2基因编码区全长,并克隆入pGBKT7中,测序结果正确,并成功转化到酵母细胞Y190中,检测无自激活作用.结论 成功构建了COX-2的酵母诱饵载体,为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础.
环氧化酶-2、酵母双杂交系统、自激活
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Q782(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划863计划2007AA02Z4Z4;北京市自然科学基金7072022;高等学校博士学科点专项科研基金200800250003
2011-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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