透明质酸对人胚胎肺成纤维细胞胶原凝胶的作用及其途径

摘要：

目的 了解透明质酸(HA)片段是否促进人胚胎肺成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs),探讨HA与细胞的相互作用对胶原收缩和降解的影响,初步研究HA与肺成纤维细胞作用的受体途径.方法 1)取人胚胎肺组织块进行肺成纤维细胞培养;2)实验分为5组:CD44抗体组(C组)、整合素β1(Integral β1)抗体组(B组)、IgG1对照抗体组(I组)、HA组(H组)和蒸馏水对照组(M组);3)肺成纤维细胞分别与CD44抗体、Integral β1抗体或IgG1抗体孵育30 min;4)将细胞悬液与胶原溶液、透明质酸溶液(200 000、0.1 g/L)混匀,共同孵育,待形成凝胶后将凝胶漂浮于培养液中,连续培养72 h;5)每24 h记录凝胶面积,留取第1个24 h的培养上清液应用酶联免疫吸附法检测MMPs,72 h后收集凝胶,应用分光光度测定法进行羟脯氨酸检测;6)应用免疫细胞化学法检测肺成纤维细胞透明质酸CD44受体.结果 1) 5个组的凝胶面积均随时间的推移而逐渐变小,C组和B组的凝胶面积在各个时间点与I组和H组比较都有显著增加,差异有统计学意义(P=0.000),与对照组比较差异无统计学意义.2)肺成纤维细胞胶原凝胶中羟脯氨酸的含量以C组和M组最高,2组与B组、I组及H组比较差异有统计学意义(P＜0.05).3)肺成纤维细胞C组和B组MMP-9的水平明显低于H组和I组(P＜0.05),与M组比较差异无统计学意义;C组MMP-1的水平明显低于B组、H组和I组(P＜0.05),与M组比较差异无统计学意义.4)HA可促进肺成纤维细胞CD44受体的表达,以相对分子质量为200 000的片段作用最强.结论 HA对人肺成纤维细胞MMPs的分泌有促进作用,加剧了胶原凝胶的收缩和降解,这种作用可被CD44抗体所抑制,也可被Integrin β1抗体部分抑制.

关键词：透明质酸、肺成纤维细胞、基质金属蛋白酶、CD44、整合素β1

所属期刊栏目：30

分类号：R563(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：北京市优秀人才20071D0300500083

在线出版日期：2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：504-509