10.3969/j.issn.1672-979X.2014.05.001
细菌透明质酸酶基因工程菌的构建及高效表达
目的 将兽疫链球菌透明质酸酶hyl基因在大肠杆菌原核表达系统中高效分泌表达.方法 通过PCR方法扩增得兽疫链球菌hyl基因,Xho Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切后,连入表达载体pET26b(+),并转化入大肠杆菌,经低温异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)或乳糖诱导表达,DNS法检测胞外透明质酸酶活性.结果 成功构建含兽疫链球菌透明质酸酶基因hyl的大肠杆菌基因工程菌株,经IPTG诱导并添加甘氨酸后胞外透明质酸酶活性高达5.3×104 U/mL.结论 实现了透明质酸酶在原核系统中的表达,为工业化生产奠定了基础,具有很好的市场前景.
兽疫链球菌、透明质酸酶、大肠杆菌、基因工程、分泌表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
济南市重大专项201403009
2014-12-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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