大黄鱼类IV型抗冻蛋白基因的克隆、表达及功能研究

摘要：

目的 研究大黄鱼类IV型抗冻蛋白基因编码产物的功能.方法 从大黄鱼肝脏SSH cDNA文库筛选到的类似极地鱼类IV型抗冻蛋白的EST序列出发,用RACE方法克隆IV型抗冻蛋白基凶全长cDNA,RT-PCR分析此基因在大黄鱼不同组织内的表达.构建原核表达载体pGEX-4T-Lycarp并表达蛋白质,亲和层析纯化GST融合蛋白,分析它的体外细菌抗冻保护作用.结果 大黄鱼类IV型抗冻蛋白基因cDNA全长664 bp,包含372 bp开放阅读框,编码124个氨基酸,经Signal P 3.0软件预测其N端前20位氨基酸为信号肽,氨基酸序列与长角杜夫鱼IV型抗冻蛋白同源性高达52%:RT-PCR分析表明其mRNA仅在肝脏表达;重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,初步纯化后分析体外细菌抗冻保护作用表明,融合蛋白抗冻活性并不明显.结论 大黄鱼类IV型抗冻蛋白不具有显著的抗冻活性,这与大黄鱼不能在低温下生存吻合.

关键词：鱼类IV型抗冻蛋白、RACE、抗冻活性、大黄鱼

所属期刊栏目：11

分类号：R973(药品)

在线出版日期：2009-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-19