烟草CYP71基因的克隆与原核优化表达

摘要：

本文从烟草中克隆出 CYP71基因,进行生物信息学分析,并在原核细胞中表达出目的蛋白.应用 RT-PCR,从野生型烟草(Nicotiana tabacum)叶片中克隆出一种 CYP450 cDNA 序列(CYP71).序列分析表明,烟草CYP71基因 ORF长为1545 bp,编码514个氨基酸,基因登录号为 KC480444.1.将去除跨膜信号肽及密码子优化后的基因合成后,构建至 pET-30a 表达载体,转化到大肠杆菌 Rosetta (DE3) 中,经 IPTG 诱导和 SDS-PAGE电泳、Western-blot 检测,获得与预期一致的49 KDa 蛋白质,为进一步研究 CYP71基因的抗虫功能奠定了基础.

关键词：烟草、CYP71、基因克隆、生物信息学分析、原核表达

所属期刊栏目：37

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目31071755/C1408

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：12-16