转CmTreⅡ基因水稻RNAi效应的室内和田间抗性及遗传性鉴定

摘要：

本研究采用农杆菌介导的遗传转化技术,将CmTreⅡ(膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点)导入粳稻中花11号中,利用CmTreⅡ-dsRNA(含有膜结合型海藻糖酶基因一个靶位点的双链RNA)的沉默效应,沉默稻纵卷叶螟的膜结合型海藻糖酶,最终获得一批抗虫性较好的转基因纯合株系.研究中进一步检测了这些株系的室外卷叶率、白叶率以及室内抗虫性.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测转基因水稻室内抗虫性CmTre2基因的相对表达量.通过RT-PCR技术检测了转Cm TreⅡ基因水稻的遗传性.结果显示:在室外抗虫性试验中,稻纵卷叶螟对水稻的取食量明显下降,转Gm TreⅡ基因水稻的卷叶率和白叶率分别为13.40％和12.47％,相比对照组分别下降了11.32％和10.10％;在室内抗虫性试验中,RT-qPCR检测结果表明,稻纵卷叶螟在取食转CmTreⅡ基因水稻的96 h后,Cm Tre2基因的相对表达量比对照组下降了29.00％;7 d后,实验组的死亡率为56.67％,相比对照组增加了46.67％.在遗传性试验中,检测发现转CmTreⅡ基因水稻的遗传性良好.因此本研究成功鉴定了转CmTreⅡ基因水稻对稻纵卷叶螟的抗虫性以及遗传性.

关键词：稻纵卷叶螟、转基因、抗虫性、膜结合型海藻糖酶、RNA干扰

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分类号：Q958.1;S443.3(273)(动物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31360443;贵州省科技创新人才团队项目黔科合人才团队[2014]4001号

在线出版日期：2017-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：40-45