烟草CSN4基因的原核表达及纯化

摘要：

以野生型烟草(Nicotiana tabacum)为试验材料,采用RT-PCR克隆获得CSN复合体亚基CSN4cDNA序列,基因登录号为KC866360.序列分析表明,CSN4基因ORF长为1194 bp,编码398个氨基酸,蛋白分子质量为43.78 kDa.将CSN4构建至原核表达载体,获得重组子pET28a-CSN4/BL21(DE3),通过Ni-IDA亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western Blotting检测,结果显示:0.25 mM IPTG,15℃诱导16h获得浓度为0.476 mg/mL、纯度高达95％的CSN蛋白,为后续CSN4基因功能研究奠定了基础.

关键词：COP9信号复合体、基因克隆、原核表达、亲和纯化

所属期刊栏目：36

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：烟草行业重点实验室开放课题中烟办[2015]-06号

在线出版日期：2017-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24