甘蓝型油菜 SSR－PCR 体系优化

摘要：

SSR－PCR 体系的优化是 SSR 分子标记的基础，本实验利用正交 L9（34）设计实验对油菜 PCR 反应体系：Mg2＋、dNTP、引物、Taq 酶4个因素设计了3个水平进行优化实验，又进行反应体系温度和银染液浓度优化，获得最佳体系：10×buffer、1.5 mmol ／LMg2＋0.1 mmol ／LdNTP、0.4 mmol ／L 引物、0.05 U Taq 酶、100 ng／ul 模板，加 ddH20补足10 ul，最适 PCR 反应程序94℃预变性3 min，94℃变性30 s，60℃30 s，72℃45 s 进行1个循环，接下来的8个循环每循环降低0.5℃，共9个循环，然后进行94℃30 s，57℃30 s，72℃45 s，进行36个循环，最后72℃延伸10 min，4℃保存，银染最适浓度0.1％，确立了一套高效的体系。

关键词：油菜、SSR、优化

所属期刊栏目：34

分类号：S565.4(经济作物)

资助基金：地区科学基金项目“利用关联性分析和连锁分析发掘甘蓝型油菜分枝优异等位变异”，编号31360344。

在线出版日期：2016-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：30-36