内切葡聚糖酶基因在穿梭载体中的表达研究

摘要：

将无信号肽编码序列的内切葡聚糖酶基因(GenBankNo.DQ782954)与表达载体PMK4连接后转化大肠杆菌DH5α,筛选出阳性转化子DH5 α- PMK4 - egls,并将提取的质粒转化到枯草芽孢杆菌WB600原生质体内,获工程菌WB600 - PMK4 - eg1s.同时,通过刚果红染色和SDS - PAGE分析表明,该基因在枯草芽孢杆菌中得到了表达.通过优化培养基因工程菌,胞外上清液中的酶活力达998U,该酶促反应的最适温度为60℃,最适pH为6.0,且pH在4.5 ～7.5,温度在30℃ ～65℃范围内,可保持最高酶活的70％以上.

关键词：内切葡聚糖酶基因、枯草芽孢杆茵、原核表达、穿梭表达载体、酶学性质

所属期刊栏目：31

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：贵州省2010年度农业攻关项目黔科合NY字20103047号

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：111-115